化妝品中富含多種營養物質，包括醇類，胺類，脂肪，蛋白質，氨基酸，維生素，水等。不僅能夠提供微生物生長所需的豐富的碳源、氮源等營養成分,并利于微生物的生長和繁衍。化妝品被微生物污染化妝品后 會影響化妝品的品質, 可能導致外觀色澤、氣味的改變, 乳化體系、失去功效等; 另外化妝品因被微生物污染而變質會對消費者的健康造成危害, 表現為對皮膚的刺激，以及引起疾病。微生物的特點是種類多，繁殖速度快，分布廣泛并容易變異。由于微生物這些特點，因此它存在于我們生活中的每一個角落，也導致了化妝品微生物的污染是多種多樣的，為化妝品的生產和保存帶來了困難。化妝品微生物的污染源可能在消費者使用過程中帶來的污染，也可能源于化妝品原料，產品包裝以及生產設備上的殘留物。為避免化妝品受到微生物污染，目前主要的方法是在產品中添加適量的防腐劑，以抵御微生物的一次污染或多次污染。通過防腐功效測試實驗對防腐效能進行有效的評估，以判斷防腐體系是否足夠耐受微生物的污染。
目前國內外使用較多的防腐功效測試實驗，即微生物挑戰性試驗，主要有：美國藥典(USP)、美國檢驗方法及材料協會(ASTM E-640)、盥洗用品和香料協會(CTFA)、歐洲藥典(EP)、國際標準化組織(ISO 11930-2012)等推薦的方法。微生物挑戰性試驗的基本原理是在化妝品中加入一定量的微生物，定期檢測微生物生長情況，以此判斷防腐劑的防腐效能。不同的國家、不同的組織采用的測試菌種、接種方式和接種次數、接種濃度和接種量、檢測周期和評價標準等都有所差異。
一、防腐功效實驗選用的測試菌種
防腐功效實驗中，菌種的選擇非常重要，選擇原則一般應包括革蘭氏陽性菌，革蘭氏陰性菌，酵母菌，霉菌，這幾類微生物中每類至少選一種。或者還可以選擇產品生產、包裝、儲存和使用過程中有可能污染的微生物，這些污染的微生物能反映實際環境的污染狀況，加入到防腐功效測試，一定程度上能更加有效的評價防腐體系的抑菌性能。
二、接種方式和接種次數
在測試產品中加入特定的微生物的方式分為兩種：1.混合培養法;2純培養法(單一培養物)。混合培養法的優勢是比較便捷，工作量小，通過一次挑戰測試就能完成幾種菌株的測試，模擬實際環境中微生物的特點，但混合培養法是不能有針對性的測試對每一種菌種的抑制效果。純培養法的優點是能夠有針對性的測試防腐體系對每種測試菌種的抑制效果，更全面的評估防腐體系，缺點是一份試樣僅測試一種菌，工作量較大，測試情況不能完全模擬自然環境。接種次數主要是一次加菌，但特殊情況可多次加菌。一次加菌較適用于一次性使用產品，多次加菌較適用于容易被消費者反復接觸而污染的產品，而且多次加菌對防腐體系的抑菌能力要求更為嚴格，一定程度上需要增加防腐體系的用量。以下是5種防腐功效測試標準中推薦的接種方式和接種次數：
三、接種濃度和接種量
測試菌種用每種特定微生物最適的培養基培養后，用無菌生理鹽水分散和轉移菌種(黑曲霉用無菌生理鹽水和吐溫80混合液來分散和轉移)，再用無菌生理鹽水(無菌生理鹽水和吐溫80混合液)稀釋至特定濃度后，用于測試樣品的加菌。細菌培養基推薦：胰蛋白酶大豆瓊脂培養基(TSA)或大豆酪蛋白消化瓊脂培養基;真菌培養基推薦：沙氏葡萄糖瓊脂培養基(SDA)或馬鈴薯葡萄糖瓊脂培養基(PDA)。5種防腐功效測試標準方法中微生物接種濃度的數量級范圍基本一致。具體如下表所示：
菌懸液配制時，可以通過與麥氏比濁法中的比濁管比對，可以通過紫外分光光度計測定吸光度，可以使用血細胞儀或其他可重復的直接顯微鏡計數技術來初步確定菌懸液的濃度。最后，通過平板稀釋法，將菌懸液梯度稀釋后，平板計數確定菌懸液濃度值。
四、檢測周期
檢測時間節點的選擇，基本是7天，14天，28天，部分標準中，會針對特殊劑型產品增加檢測節點。
以上是化妝品防腐效能試驗方法簡單介紹，需要了解化妝品防腐效能試驗方法更詳細的內容可以聯系簡愷生物的技術客服。簡愷生物實驗室檢測方法成熟，經驗豐富。簡愷生物對每個產品都進行防腐挑戰試驗并符合《化妝品安全技術規范》(2015版)的規定。
【本文標簽】 化妝品防腐效能試驗方法
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